1  试验配景

加州鲈原名大口黑鲈，分类学上属鲈形目，太阳鱼科，原产美国加利福尼亚州密西西比河水系，是一种肉质鲜美、抗病力强、生长迅速、易起捕、适温较广的名贵肉食性鱼类。我国于上世纪80年
代引进加州鲈鱼苗，并人工滋生乐成。2018年全国加州鲈产量达43.21万吨，成为名副其实的明星鱼。虽然现在加州鲈的苗种驯化、养殖、饲料技术等日趋成熟，但普遍还保存放养密度过大、投喂过
量、水质底质恶化、频繁消毒用药、投喂冰鲜鱼等情况。这些情况都会导致加州鲈爆发肝脏病变，造成鱼体免疫力下降、代谢紊乱、易熏染其他病原性疾病，死亡率增高，有的塘口死亡率可高达50%
以上，给养殖户造成重大的经济损失。

另外，加州鲈养殖中为了追求生长速度，太过投喂饲料或者是冰鲜，由于加州鲈摄食量大，投喂的饲料或冰鲜也多，过多的投喂造成浪费会残留在水体中造成水体的污染，当水质变革，溶氧低等
引起鱼体对抗力下降，会使得加州鲈患肠炎病的几率大大增加。因此加州鲈的肝肠问题亟待解决。

尊龙凯时舒^?主要成份组成：黄芪提取物、杜仲提取物、金银花提取物、苦木提取物等植提复方，具有“抑菌杀菌与抗病毒+提高免疫与抗病力+；の赋︷つて琳稀比灰惶遄酆细纳聘纬】，提高
抗病力、促生长的效果。本试验以加州鲈为研究工具，评价尊龙凯时舒在加州鲈养殖中的应用效果，重点考察尊龙凯时舒对加州鲈生长性能、免疫功效和肝肠健康的改善作用。

2  试验目的

研究饲料中添加差别水平尊龙凯时舒对加州鲈生长、消化、免疫功效及抗应激的影响，确定尊龙凯时舒的应用效果及饲料中最佳添加水平。

3  试验设计

3.1  试验工具

选择加州鲈为试验动物，初均重5.3g左右。

3.2  试验组别

每个处理3个重复，每个重复25尾加州鲈，试验周期8周。      

养殖条件：每天2次（8:00和16:00）表观餍饫投喂。整个养殖系统不间断充气, 水体溶解氧含量≥6mg/L, 氨氮为（0.15±0.05）mg/L, pH 为（7.2±0.2）, 温度为（25±2）℃ 。养殖实验期间接纳自然光
照周期。 

利用试剂盒剖析血清免疫指标、肝脏抗氧化和消化酶指标，高通量测序剖析肠道微生物组成，组织切片法和电镜剖析肝脏及肠道组织形态。

4  试验结果

4.1 尊龙凯时舒对加州鲈生长性能的影响

由表2可知，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%尊龙凯时舒，养殖试验期间加州鲈存活率均为100%，增重率、特定生长率、采食量均泛起差别水平的提高。其中，饲料中添加0.075%尊龙凯时舒的加州鲈
增重率、特定生长率、采食量均显著增加（P＜0.05），增重率较比照组增加了9.62%。饲料中添加尊龙凯时舒的加州鲈平均肥满度有一定水平提高，鱼体形态更为美观。这些结果提示饲料中添加一定量的尊龙凯时舒能
提高加州鲈采食量和生长性能，改善形体指标。

4.2 尊龙凯时舒对加州鲈血清免疫指标的影响

由表3可知，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的尊龙凯时舒均显著提高了加州鲈血清AKP活性（P＜0.05），实验组和比照组血清ACP和IgM差别不显著，添加0.05%、0.075%和0.1%的尊龙凯时舒血清
补体C3活性有一定上升。这些结果提示尊龙凯时舒能一定水平上提高加州鲈免疫功效。

4.3 尊龙凯时舒对加州鲈肝脏消化和代谢酶活性的影响

由表4可知，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的尊龙凯时舒各组淀粉酶活性无显著差别，脂肪酶活性呈差别水平上升，其中0.03%组显著上升（P＜0.05）。饲料中添加0.03%和0.1%的尊龙凯时舒肝脏
胰卵白酶活性显著下降（P＜0.05），饲料中添加0.05%、0.075%的尊龙凯时舒肝脏胰卵白酶活性无显著影响。饲料中添加尊龙凯时舒加州鲈肝脏ALT活性均显著高于比照组，AST活性高于比照组，但差别不显著。这
些结果提示饲料中添加一定含量的尊龙凯时舒能够改善加州鲈肝脏代谢。

4.4 尊龙凯时舒对加州鲈肝脏抗氧化能力的影响

由表5可知，饲料中添加0.03%、0.05%、0.075%和0.1%的尊龙凯时舒均能提高加州鲈肝脏总氧化酶活性，其中0.075%尊龙凯时舒组试验结果最为明显，总抗氧化能力活性较比照组提高了71.4%，并明显降低了
加州鲈肝脏MDA含量。0.05%尊龙凯时舒能显著提高加州鲈肝脏GSH-PX活性，0.03%尊龙凯时舒能显著提高加州鲈肝脏SOD活性（P＜0.05）。这些结果提示饲料中添加尊龙凯时舒可提高加州鲈抗氧化能力。

4.5 尊龙凯时舒对加州鲈肝脏组织形态的影响

凭据现场采样情况（图1），收罗的肝脏颜色总体呈暗红色，形态正常，均未泛起脂肪肝现象，就整体而言，试验组的肝脏体积较比照组稍大一点，其他并无显著差别。

由图2可视察，加州鲈伸入肝脏实质内结缔组织较少肝组织致密，肝小叶间界线不是十明白显，低倍镜下可大致区分出肝小叶和门管区结构。肝小叶以中央静脉为中心，肝细胞索在其周围呈不规则的放
射状排列，胆细胞索间的血窦较为明显。结果提示在饲料中添加尊龙凯时舒并不会对肝脏的组织形态造成影响。

4.6 尊龙凯时舒对加州鲈肠道组织结构及其屏障的影响

凭据图3显示，加州鲈肠道黏膜为纵行黏膜褶皱，黏膜上皮外貌具有许多排泄孔及较多腺体导管的开口，似鳞片状，连接紧密。肠黏膜漫衍着密集排列的肠绒毛，绒毛呈拇指状或扁平状。肠上皮外貌呈
脑回状漫衍有许多排泄颗粒，细胞游离面漫衍着富厚的微绒毛，其中0.075%试验组较比照组褶皱越发紧密，肠绒毛更为密集，漫衍着更为富厚的微绒毛。

肠上皮屏障是由肠上皮细胞和细胞间的紧密连接所组成，紧密连接是处于细胞间最顶端的结构，卖力细胞与细胞间的粘附，极性以及对一些电解质的通透性。一旦粘膜屏障被破坏，粘膜下层将会袒露于
大宗的病原微生物下，从而加剧肠道炎症的生长，因此维持紧密连接卵白的表达正常关于；こΦ榔琳，具有重要意义。因此我们检测了空肠紧密连接卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4基因相对
表达水平，从图4中可以看出，与正常比照组比较，0.03%、0.05%和0.075%尊龙凯时舒处理组空肠紧密连接卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4的基因相对表达水平均有差别水平的提高，其中0.075%
尊龙凯时舒处理组空肠紧密连接卵白相关基因ZO-1、Claudin-1和Claudin-4的基因相对表达水平提高最为显著（P＜0.05）？杉，饲料中添加尊龙凯时舒可以改善加州鲈肠道组织结构，并且有利于提高肠道物理屏
障相关基因的表达。 

4.7 尊龙凯时舒对加州鲈肠道微生物的影响

由图5可知，在门水平，各组加州鲈肠道的优势菌为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、酸杆菌门、放线菌门等，0.075%试验组厚壁菌门、拟杆菌门品貌略低于比照组，而梭杆菌门品貌明显上升。在属水
平，0.075%试验组鲸杆菌（常见有益菌）品貌明显上升。PCoA剖析和β-多样性显著性剖析（图6）均标明，试验组与比照组加州鲈肠道菌群β-多样性保存一定差别，尤其是0.075%试验组差别较大？杉，
饲料中添加尊龙凯时舒对加州鲈肠道菌群结构爆发了一定的调理作用。

5 试验结论

5.1  饲料中添加0.03-0.10%的尊龙凯时舒均能提高加州鲈采食量、生长性能和肥满度。0.075%添加效果最佳，增重率较比照组提高了9.62%。

5.2 饲料中添加0.03-0.10%的尊龙凯时舒能改善加州鲈免疫功效、抗氧化能力和肝脏代谢。

5.3 饲料中添加0.075%的尊龙凯时舒能有效改善加州鲈肠道组织结构和菌群结构，上调肠道物理屏障相关基因的表达。

      综上，加州鲈饲料中尊龙凯时舒的建议添加量为0.075%（750g/T）。

（集美大学）